配制環(huán)凱培養(yǎng)基必須使用高質(zhì)量的水，如石英玻璃蒸餾器經(jīng)三次蒸餾或超純水凈化裝置制備的水結果。因?yàn)槠淙狈α搜逯刑烊怀煞种泻投舅貞鹇圆季?、保護(hù)細(xì)胞的大分子，既便水中的有毒物質(zhì)含量甚微規則製定，也可能對細(xì)胞產(chǎn)生致死性損害講道理。這是無血清培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵因素之一。

 

　　補(bǔ)充因子是代替血清的各種因子的總稱實際需求。環(huán)凱培養(yǎng)基必須補(bǔ)加3-8種因子配套設備，胰島素和轉(zhuǎn)鐵蛋白是必須補(bǔ)充因子，其他多數(shù)為輔助作用的因子性能。按其功能不同建議，補(bǔ)充因子可分為五類：

 

　　1、結(jié)合蛋白：常見如轉(zhuǎn)鐵蛋白和牛血清白蛋白設計。轉(zhuǎn)鐵蛋白與細(xì)胞上的轉(zhuǎn)鐵蛋白受體結(jié)合是細(xì)胞獲取鐵元素的主要來源。白蛋白與脂類、激素、維生素對外開放、金屬離子和生長因子結(jié)合后可調(diào)節(jié)上述物質(zhì)在無血清培養(yǎng)基中活性的作用互動式宣講，此外，由于牛血清白蛋白一般添加量比較大用的舒心，可增加培養(yǎng)基的粘度結構，保護(hù)細(xì)胞免受機(jī)械損傷。

 

　　2模式、激素和生長因子：很多細(xì)胞用無血清培養(yǎng)時(shí)需要加入激素效果較好，如胰島素、生長激素貢獻、胰高糖素等廣泛應用。胰島素是重要的細(xì)胞存活因子，與細(xì)胞上的胰島素受體結(jié)合后可促進(jìn)RNA持續、蛋白質(zhì)和脂肪酸的合成情況，抑制細(xì)胞凋亡。此外高品質，雌二醇等多個領域、孕酮等也是無血清培養(yǎng)基中常添加的補(bǔ)充因子。

 

　　3統籌、酶抑制劑：培養(yǎng)貼壁生長的細(xì)胞哪些領域，需要用胰酶消化傳代，在無血清培養(yǎng)基中須含酶抑制劑產品和服務，以終止酶的消化作用像一棵樹，達(dá)到保護(hù)細(xì)胞的目的。

 

　　4不斷創新、貼壁因子：許多細(xì)胞必須貼壁才能生長發展的關鍵，這種情況下無血清培養(yǎng)基中一定要添加促貼壁和擴(kuò)展因子，一般為細(xì)胞外基質(zhì)求得平衡，如纖粘連蛋白無障礙、膠原蛋白等。它們還是重要的分裂素以及維持正常細(xì)胞功能的分化因子宣講活動，對許多細(xì)胞的繁殖和分化高產，起著重要作用。纖粘連蛋白主要促進(jìn)來自中胚層細(xì)胞的貼壁與分化快速融入，這些細(xì)胞包括成纖維細(xì)胞帶動產業發展、肉瘤細(xì)胞、粒細(xì)胞發揮作用、腎上皮細(xì)胞、腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞系統、CHO細(xì)胞、成肌細(xì)胞規模、CHO細(xì)胞等逐步顯現。

 

　　5、其他補(bǔ)充因子：一些細(xì)胞培養(yǎng)使用的無血清培養(yǎng)基還需要補(bǔ)充微量元素、維生素近年來、脂類等低分子量物質(zhì)。